技术简介：

蛋白质翻译后修饰（PTMs）在生命活动中具有至关重要的作用，而蛋白质磷酸化是生物体内最重要的翻译后修饰之一，其主要过程是蛋白质上的特定氨基酸残基（通常是丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸）与磷酸基团结合的过程，这一过程由蛋白激酶促进，并可以通过蛋白磷酸酶进行逆转。蛋白免疫印迹(Western Blot，WB)作为一种实验技术可进行体外磷酸化检测，具体流程包括SDS-PAGE 分离蛋白样本并转至 PVDF膜上，随后使用磷酸化抗体检测磷酸化蛋白质，而对于丰度低的蛋白，可先用目的蛋白抗体IP对蛋白进行富集，再进行WB检测被磷酸化的蛋白，检测效率可以大大。原理图如下：

应用范围：

1、检测蛋白磷酸化水平；

公司优势：

1、含有多种植物标签抗体，高效检测转基因植物蛋白表达；

2、可配合互作检测和蛋白修饰检测服务。

服务流程：

咨询下单—实验信息确认—样本寄送—CoIP/WB检测—结果交付。

结果交付：

标准实验报告，包括实验步骤与结果；

蛋白WB检测图。

送样要求：

WB检测组织样本需要干冰寄送，且质量不少于2g。

本司服务案例（以FLAG标签蛋白为例）：

结果初析：使用FLAG抗体对注射A-FLAG烟草样本进行IP，WB检测显示有明显的条带，说明目的蛋白A顺利表达并IP成功。使用GFP抗体对注射B-GFP烟草样本进行WB检测，显示有明显的条带，说明目的蛋白B成功表达。使用磷酸化抗体(pSer)对不同组别样本进行WB检测，显示单独表达A蛋白时，目的蛋白有微弱的磷酸化条带。而同时表达A和B蛋白时，目的蛋白A磷酸化条带明显增强，说明B蛋白可以促进目的蛋白A的磷酸化程度。