技术简介：

免疫共沉淀（Co-IP）以抗体和抗原之间的特异性结合为基石，用于研究两个蛋白质在活体细胞内相互作用的经典方法。该技术利用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白质，从而鉴定体内真实存在的蛋白质间相互作用。当细胞在非变性条件下被裂解时，细胞内的蛋白质复合物会被完整的保留，与琼脂糖磁珠结合的A蛋白抗体可特异性免疫沉淀A蛋白，此时与A蛋白在相互作用的蛋白质B也能一起沉淀下来，通过对B蛋白进行WB检测，可以证明两者间的相互作用。同时，免疫沉淀后的产物通过质谱检测也可用于筛选与目标蛋白质互作的未知互作蛋白。原理图如下：

应用范围：

1、检测两个蛋白质在体内的互作情况；

2、结合质谱检测筛选与特定蛋白相互作用的未知蛋白。

公司优势：

1、自研总蛋白和细胞器蛋白提取试剂，结合目的蛋白亚细胞结果提高目的蛋白提取成功率；

2、不同植物转化体系，使得植物受体选择更加广泛。    

服务流程：

咨询下单—确定实验信息—载体构建—植物受体转化—IP和WB检测—结果交付。

结果交付：

标准实验报告，包括实验步骤与结果；

CoIP检测WB图片；

发表级别的组图。

送样要求：

植物组织需要活体寄送；

IP-MS实验组织样本需要干冰寄送，不低于10g;

告知蛋白标签/特异性抗体信息；

载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml，冰袋运输；

质粒 DNA 体积大于20 μl，浓度不低于30ng/μl,，且主带明显无降解；

提供测序结果以及抗性；

如需我司构建载体，要求详见载体构建。

本司服务案例（以烟草叶肉细胞为例）：

结果初析：目的蛋白A和B分别融合FLAG和GFP标签，注射烟草后进行IP及WB检测。其中，FLAG抗体检测显示：input样本都有明显的条带说明共转化成功，使用FLAG抗体对IP下来的产物进行WB检测发现也有明显的条带，说明IP成功。GFP抗体检测显示：input样本都有明显的条带说明共转化成功，同时使用GFP抗体对IP下来的产物进行WB检测也出现目的条带，说明蛋白A和B之间存在互作。