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技术服务

技术简介:

启动子是位于结构基因5‘端上游的DNA序列,长度从100bp到2000bp不等,其在转录水平上调控基因的起始时间和表达程度。目前,启动子的表达模式及强度可以通过连接报告基因来检测,通常包括GUS、 GFP、LUC等。原理图如下:


8、启动子活性检测原理.jpg 

应用范围:

1、 稳定转化分析启动子在研究植物中的表达位置和表达强度;

2、 瞬时转化分析启动子活性的强弱;

3、 序列突变分析启动子的顺式作用元件。

公司优势:

1、本司有功能齐全的GUS、 GFP、LUC报告载体及对应的阴阳性对照载体 ;

2、本司有多种植物稳定转化和瞬时转化技术,并可同时定性和定量检测启动子活性;

 服务流程:

咨询下单—确定实验信息—载体构建—植物转化—报告基因活性检测—结果交付。

结果交付:

标准实验报告,包括实验步骤与结果;

GFP报告基因系统: GFP荧光图片;

GUS报告基因系统: GUS染色图片及定量分析柱状图,瞬时转化附送阴阳性对照组;

LUC报告基因系统:荧光素酶活性显色图片及定量分析柱状图(附送阴阳性对照组);

发表级别的组图。

送样要求:

植物组织需要活体寄送;

载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml,冰袋运输;

质粒 DNA 体积大于20 μl,浓度不低于30ng/μl,,且主带明显无降解;

提供测序结果以及抗性;

如需我司构建载体,要求详见载体构建。

本司服务案例(以GUS、荧光素酶检测为例):

微信图片_20250717175425.jpg

结果初析:1、启动子截短后连接GUS注射烟草细胞并进行染色及活性检测。2、启动子连接GUS报告基因进行胁迫和激素处理。3、拟南芥不同组织器官的GUS染色检测。

作图.jpg

结果初析:启动子全长及截短后注射烟草叶肉细胞进行荧光素酶检测。启动子全长(3)活性较强,且比35S启动子活性弱。截短至pro-2时活性基本没变化,截短至pro-1时活性明显减弱。

8、启动子活性检测-植物.jpg 

结果初析:启动子全长及截短后注射烟草叶肉细胞进行荧光素酶检测。启动子全长活性较强,且比35S启动子活性弱。随着序列截短启动子活性逐步减弱,并在2-3时减弱最明显。

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