技术简介：

双荧光素酶报告基因检测系统（Dual-Luciferase Reporter Assay）由萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)和海肾荧光素酶(Rellina Luciferase)组成, 该双报告基因系统相对于单报告基因系统可以提高实验准确性，增加实验数据可信度。在具体实验操作中，海肾荧光素酶基因作为内参使用，萤火虫荧光素酶在特定实验条件下可以表达，两种荧光素酶可以催化各自的底物而显现出生物荧光，随后通过荧光测定仪测定反应过程中释放的两种生物荧光，最后通过分析萤火虫荧光素酶活性的变化判断相应调控元件的活性。原理图如下：

应用范围：

1、检测启动子活性和相应顺式元件对启动子活性的影响；

2、检测转录因子对下游启动子的转录调控；

3、检测microRNA对相关基因的靶向和调控作用

4、检测microRNA和lncRNA的调控研究

5、检测转录因子广义上的调控活性。

公司优势：

1、本司长期种植水稻、烟草、拟南芥等幼苗，实验周期短；

2、不同转化系统阴阳性对照，排除背景干扰、信号微弱等技术问题，确保检测灵敏度与准确性；

3、本司可根据老师要求安排不同植物种植，并进行双荧光素酶检测；

4、启动子表达载体插入位置插入Pmin35S序列基本元件，可检测顺式元件的表达；

5、可结合荧光素酶成像实验，保证实验准确性。

服务流程：

咨询下单—实验信息确认—载体构建—植物转化和荧光素酶检测—结果交付。

结果交付：

标准实验报告，包括实验步骤与结果；

荧光素酶检测原始数据，处理数据和柱状图；

可选：荧光素酶成像图片。

送样要求：

植物组织需要活体寄送；

载体需要新鲜或甘油菌液体积大于0.5 ml，冰袋运输；

质粒 DNA 体积大于20 μl，浓度不低于30ng/μl,，且主带明显无降解；

提供测序结果以及抗性；

如需我司构建载体，要求详见载体构建。

本司服务案例（以烟草叶肉细胞为例）：

结果初析：miRNA与靶序列及突变序列注射烟草叶肉细胞进行荧光素酶检测。miRNA可结合野生型序列并降解荧光素酶的表达，而在目的序列发生突变后，miRNA丧失结合序列的能力。

结果初析：转录因子与启动子全长及截短后序列注射烟草叶肉细胞进行荧光素酶检测。TF激活启动子全长表达，截短至pro-1时仍存在激活作用，截短至pro-2时激活作用消失。